La Iglesia Colegial, dedicada a Santa María de estilo gótico-renacentista,
La tierra que vio morir a Cisneros y al Empecinado
Es el edificio más emblemático de Roa de Duero. Situada en la Plaza Mayor de la Villa es una monumental Excolegiata, dedicada a la Asunción de Nuestra Señora. Es renacentista, de Pedro Resines y los Naveda en 1566. Tiene tres naves, y capillas, con columnas cilíndricas, arcos y bóvedas estrelladas. Y multitud de inscripciones y escudos, con contrafuertes-pilastrones al exterior y aleros moldurados. Su ábside es poligonal con contrafuertes, tres ventanales y escudos de los Velasco y otros. La portada es renacentista, con columnas, remate de escudos y relieve de la Asunción con frontón circular, enmarcada en pórtico de gran arco de medio punto con casetones, frontón, remate de bolas y cruz y dos escudos, de 1593. Tiene, además, otras dos portadas cegadas, una románica y otra gótica.

La torre es rectangular, de tres cuerpos y chapitel, con decoración en alero, cuatro huecos y cuatro campanas.

La pila es gótica con guirnalda floral en borde, cenefa de rosetas, pie cilíndrico y base cuadrada; y el retablo mayor, recién restaurado, es barroco. Se ha recuperado también una imagen de la Santísima Trinidad, procedente de otra antigua iglesia y un Crucificado gótico, del siglo XIV, que antes coronaba el retablo y está colocado ahora su derecha. Hay también un Crucificado de mesa y un relieve de a Adoración de los Reyes, romanista, en restauración. Hay dos Crucificados de pared del siglo XVI, una Virgen sedente con Niño gótica, mutilada. Hay enterramientos con estatuas yacentes y relieves de la Pasión. Tiene una sillería coral gótica del siglo XV. Y hay restos del antiguo claustro gótico.

Sus libros parroquiales comienzan en 1651 y hay un documento de 1465