El retablo del altar mayor está dedicado a la asunción de la santísima Virgen. Es barroco, del siglo XVII. Sus autores fueron Diego Alonso de Suano, Lucas de la Concha, Martín del Hoyo (talla de la Asunción) y Ventura Fernández, en sus distintos aspectos. Tiene una altura de unos 20 m., con doce columnas salomónicas. Incluye a San Ambrosio, segundo patrono de Villasandino.